裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)是從體外細(xì)胞試驗(yàn)到動(dòng)物水平體內(nèi)試驗(yàn),是基因功能研究的重要飛躍。動(dòng)物實(shí)驗(yàn),由于其更能模擬人類(lèi)的生理和病理?xiàng)l件,在科研上,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)獲得的結(jié)果,將有更強(qiáng)的說(shuō)服力。腫瘤研究中,最常規(guī)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)就是裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)。由于大部分腫瘤研究使用的是人類(lèi)細(xì)胞,所以由于異種排斥的存在,我們需要免疫缺陷型小鼠來(lái)作為移植瘤模型的載體,通過(guò)對(duì)該小鼠的注射腫瘤細(xì)胞,使其成瘤,觀察流體的生長(zhǎng)來(lái)判斷其生物學(xué)變化。
病理實(shí)驗(yàn)檢測(cè)技巧:
??????1. 預(yù)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)查文獻(xiàn)看看要用的細(xì)胞系能不能成瘤,注射的細(xì)胞數(shù)量,注射條件等,查完以后做一次預(yù)實(shí)驗(yàn),設(shè)置幾個(gè)細(xì)胞量的梯度,看看文獻(xiàn)報(bào)道的是不是可行。一般預(yù)實(shí)驗(yàn)注射5只小鼠。
2. 裸鼠成瘤受外界影響很大,裸鼠來(lái)源,鼠房環(huán)境,細(xì)胞狀態(tài)(尤其重要)。國(guó)內(nèi)的細(xì)胞系和鼠房條件都很多不可控,一定要小心。支原體對(duì)成瘤和藥物敏感性影響很大,細(xì)胞要無(wú)支原體,注射前細(xì)胞保持冰上。
3. 不成瘤的時(shí)候可以換NOD SCID小鼠或者干脆換細(xì)胞系。
4. 注射的時(shí)候一定要注意別打漏了或者打到肌肉里,這樣出來(lái)的瘤子體積一致性很差。我一般采用進(jìn)針以后針尖向上挑,打的體積不超過(guò)200ul。
5. 小鼠周齡不要太大,一般控制在7周以?xún)?nèi)。
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